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液相色譜儀的基本原理及結(jié)構(gòu)組成簡(jiǎn)述
點(diǎn)擊次數(shù):2022 更新時(shí)間:2022-05-11
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
液相色譜儀工作原理
系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。
液相色譜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)組成,主要包括以下幾個(gè)部分:
1、溶劑管理系統(tǒng)也就是常說的泵,通過柱塞桿的往復(fù)運(yùn)動(dòng)為儀器流動(dòng)相提供動(dòng)能。
2、樣品管理系統(tǒng)就是進(jìn)樣器啦,分自動(dòng)進(jìn)樣和手動(dòng)進(jìn)樣:如果重現(xiàn)性不好,在系統(tǒng)壓力沒有異常的情況下,Z有可能就是進(jìn)樣部分出現(xiàn)問題了。
3、色譜柱管理系統(tǒng),也就是柱溫箱:色譜柱在這里保持恒溫狀態(tài),以免由于溫度變化導(dǎo)致色譜峰出現(xiàn)保留時(shí)間漂移的現(xiàn)象。
4、檢測(cè)器:檢測(cè)器根據(jù)檢測(cè)原理的不同,可分為很多種類;Z常見的是紫外檢測(cè)器,二極管陣列檢測(cè)器,蒸發(fā)光檢測(cè)器,熒光檢檢測(cè)器以及示差折光檢測(cè)器。